Швидкісний мікроскоп може запропонувати розуміння аутизму, шизофренії
Зараз неврологи Каліфорнійського університету в Лос-Анджелесі (UCLA) об'єднали зусилля з фізиками, щоб розробити неінвазивний надзвичайно швидкісний мікроскоп, який миттєво фіксує випалювання тисяч нейронів у мозку під час їх спілкування - або в цих випадках - неправильно спілкуватися між собою.
"На наш погляд, це найшвидший у світі двофотонний збудливий мікроскоп для тривимірного зображення in vivo", - сказав професор фізики UCLA д-р Кацусі Арісака, який розробив систему оптичного зображення з доктором Карлосом Портера-Кайо, доцентом UCLA неврології та нейробіології та колеги.
Оскільки нервово-психічні захворювання, такі як аутизм, шизофренія та розумова відсталість, як правило, не виявляють фізичних пошкоджень мозку, вони, як вважають, спричинені проблемами провідності - нейрони не спрацьовують належним чином. Звичайні клітини мають схеми електричної активності, сказав Портера-Кайо, але нерегулярні клітинні дії в цілому не створюють корисної інформації, яку може використовувати мозок.
"Однією з найбільших проблем для нейронауки в 21 столітті є розуміння того, як мільярди нейронів, що утворюють мозок, взаємодіють між собою, виробляючи складну поведінку", - сказав він.
"Найвища користь від цього типу досліджень буде при розшифровці того, як дисфункціональні моделі діяльності серед нейронів призводять до руйнівних симптомів при різних нервово-психічних розладах".
Нещодавно Портера-Кайо використовував зображення кальцію - метод, при якому нейрони поглинають флуоресцентні барвники. Коли клітини стріляють, вони «моргають, як вогники на ялинці», сказав він. "Наша роль зараз полягає в розшифровці коду, який використовують нейрони, і який похований у цих миготливих світлових моделях".
Однак, каже Портера-Кайо, ця техніка має свої обмеження.
«Сигнал флуоресцентного барвника на основі кальцію, який ми використовували, зникав, коли ми зображували глибше в корі. Ми не могли зобразити всі камери ", - сказав він.
Крім того, Портера-Каййо та його команда вважали, що їм бракує важливої інформації, оскільки вони не можуть захопити досить великий відділ мозку досить швидко, щоб виміряти груповий випал окремих нейронів. Це був ключовий фактор, який спонукав Арісаку та Адріана Ченга, одного з його аспірантів, шукати більш швидкий метод запису нейронів.
Розроблений ними мікроскоп являє собою багатофокальну двофотонну мікроскопію з просторово-часовим мультиплексуванням збудження-випромінювання (STEM). Це модифікована версія двофотонних лазерних скануючих мікроскопів, які реєструють флуоресцентні барвники кальцію всередині нейронів, але з основним лазерним променем, розділеним на чотири менших пучка.
Ця техніка дозволяє записати в чотири рази більше клітин мозку, ніж оригінальна версія, в чотири рази швидше. Також інший промінь використовувався для запису нейронів на різній глибині мозку, надаючи зображенню абсолютно новий тривимірний ефект.
«Більшість відеокамер розроблені для зйомки зображення зі швидкістю 30 знімків в секунду. Що ми зробили, це пришвидшили в 10 разів, до приблизно 250 знімків на секунду », - сказав Арісака. "І ми працюємо над тим, щоб зробити це ще швидшим".
Результатом, за його словами, "є тривимірне відео з високою роздільною здатністю активності нейрональних ланцюгів у живої тварини".
Портера-Кайо вже користується перевагами цієї техніки візуалізації у своїх дослідженнях синдрому Тендітного Х, форми аутизму. Використовуючи цю нову технологію, він може порівняти кору звичайної миші з мишкою-мутантом Fragile X і засвідчити неправильне запалювання нейронів у мозку Fragile X.
З дослідженням можна ознайомитись у виданні журналу від 9 січня Методи природи.
Джерело: Каліфорнійський університет